新的MagNA Pure 96 DNA和病毒核酸试剂盒：
兼顾快速和高产率的全新解决方案
Michael Kirchgesser*, Agnes Aschenbrenner, Irene Huber, Sarah Müller, Heike Girgnhuber, Hubert Schuldlos, Anna Werner, Werner Malmberg, Robert Steiner, Martin Victor, Thomas Kirschbaum, Claudia Kappelsberger, Michael Knoll, and Peter Wenzig
德国匹茨堡，罗氏应用科学部
*通讯作者： michael.kirchgesser@roche.com
前言
MagNA Pure 96是最近进入市场的一种全新仪器：它是一种全自动、超高速的系统，它能用于将高质量核酸从各种样品类型中高速分离，1小时以内即可完成多至96个样本的自动纯化，处理的样品容量最高达到1 ml。该系统采用装有预装式即用型试剂的优化试剂盒，并配有相应的自动分离方法。 这种试剂盒的配置基于沿用已久的磁珠技术，后者成功用于不同的MagNA Pure系统已有多年。MagNA Pure 96试剂盒由配有不同预装式密封缓冲液容器的试剂盘和含磁粉的专用瓶组成。
可提供的所有试剂盒都有小容量（SV）和大容量（LV）的不同规格，可根据要处理的样品量决定。 本文描述了2种MagNA Pure 96 DNA和病毒核酸试剂盒及其方法的特征和性能。
图1：试剂盒组件。 试剂盒、试剂盘、磁珠瓶。
材料和方法
新的试剂盒及方法是用人EDTA血浆、枸橼酸盐血浆、血清和全血以及培养细胞（K562和HeLa）作为样品材料开发和测试的。
全血不需要经过预处理即可用于基因组DNA分离。 培养细胞小球在使用前要悬浮于PBS中。
在病毒核酸分离时，使用前在样品中添加不同量的DNA病毒（巨细胞病毒、EB病毒、细小病毒B19）和RNA病毒（甲型肝炎病毒、甲型H1N1流感病毒）。然后用移液管将样品移入MagNA Pure 96仪器上的MagNA Pure 96处理盒中。所有样品至少以8倍复制进行试验。 根据实验需要，纯化核酸的洗脱体积被设定为50μl、100μl或200μl。在LightCycler® 480仪器上采用吸光度（OD）测定、琼脂糖凝胶电泳和/或参数特定的定量实时PCR和RT-PCR分析对洗脱液进行分析。采用15μl各自混合母液和5μl各自洗脱液建立扩增反应，运行45个循环。
结果和讨论
一般特征
试剂盒的组成：排列在试剂盘中的预装式试剂容器，便于加载；分开放置、含磁珠（MGP）悬液的瓶子（图1）。试剂盘和瓶子都在运行前放入仪器抽屉中各自的位置。使用后容器可以方便地重新密封，并保存以待必要时进行后续的运行。MGP瓶具有特殊的瓶盖，可以在仪器的针穿过后自动重新密封。所有组件在室温下都能保持稳定。
MagNA Pure 96 DNA和病毒核酸小容量规格用于从200μl全血，或从5×105个培养细胞中分离基因组DNA。 它还可以从200μl血浆、血清或全血中分离病毒DNA或RNA。试剂盒包括3个预装式试剂容器，每个容器最多可进行192次反应（即每个试剂盒进行576次纯化）。
来源：罗氏诊断产品（上海）有限公司
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