ELISA检测试剂盒使用指南
步骤
常见问题
解决方案
实验准备
1 加样器不准确；尤其10ul以下的加样器，对结果影响极大；
2 保温设备不良；
3 洗涤用水不规范。
1 校正加样器；10ul以下加样器最好采用进口产品（芬兰、法国等）；
2 仔细校正温度到37℃，水浴箱为佳；
3 必须使用去离子水或蒸馏水，不得用自来水、矿泉水等。
4 认真阅读使用说明书。
样品加样
1 加样不准确；
2 没有混匀。
1 加样时一定要仔细。加样后，再检查，以防漏加、错加。
2 加样后，反复抽吸3次混匀，防止血清聚集孔底，导致非特异性吸附。
洗涤
洗涤不彻底
1 每次注水洗涤，应静止30秒钟；
2 选用吸水纸作为衬垫，每次洗涤后扣干孔内水分；
3 可选用塑料洗涤瓶。
加酶反应
漏加
滴加后，认真检查各孔
结果判断
1 包括阴性对照孔在内，各孔显色普遍偏深；
2 包括阳性对照在内，各孔均无显色；
3 阳性对照不显色，而其它样本显色正常；
4 有些标本显色不深，判断阳性困难。
1 可能是洗涤不充分；加样过量；温育时间过长温度过高；按说明书重新操作。如无改善，可与生产厂家联系；
2 可能是漏加样本或酶液；温育时间过短温度过低；试剂保存不当活性下降；按说明书重新操作。如无改善，可与生产厂家联系；
3 阳性对照漏加、错加或失效。重新操作。如无改善，可与厂家联系，索要对照品；
4 重新操作。最好使用酶标仪，测定光吸收度，按P/N值标准判断。
试剂保存
保存不规范
一定要在2-8℃存放。不得过高，也不得冻存（冻存后，酶液将失效）。
对照品
对照品为冻干品
按对照管标示，加入相应体积的去离子水或蒸馏水复溶，充分溶解混匀。可按说明书使用。
其它
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