1 材料
1.1 动物：小鼠。
1.2试剂：DMEM(含血清)、无血清DMEM培养基、胰酶、PBS。
1.3 器械：饭盒、纱布、小剪子、小镊子、大镊子、大烧杯、平皿、研磨玻片、滤网、离心管(15/50 ml)、6孔培养板、吸管、移液管、手套、微量加样器。
1.4 准备：酒精擦拭台面后把物品摆放好，开紫外线灯照30分钟后开鼓风机吹至实验结束。
2 方法
2.1 将小鼠断颈致死，置75%酒精泡2-3秒钟，取肝脏，置于盛有PBS的平皿中。
2.2 剔除脂肪、结缔组织、血液等杂物，转移到另一个盛有PBS液的平皿中。
2.3 用手术剪将脏器剪成小块(大小约1mm2)，玻片研磨，转到离心管，离心(1000 rpm，5 min)。
2.4 视组织或细胞量加入5-6倍(3-5 ml)胰酶，37℃中消化20分钟，每隔5分钟振荡一次，或用吸管吹打一次，使细胞分离。
2.5 加入3-5 ml含血清的培养液以中止胰酶消化作用。
2.6 用100目孔径滤网滤过，除去未消化的大组织块。
2.7 再次离心5 min，弃上清液。
2.8 加入无血清培养液5 ml，冲散细胞，再离心一次，弃上清液。
2.9 加入含血清的培养液l-2 ml(视细胞量)，血球计数板计数。
2.10 将细胞调整到5×105/ml左右，转移至6孔培养板中，37℃下培养。
