1. 将绒毛样品从样品管中转移到直径60mm的装有5ml RPMI 1640培养基的细胞培养皿；
2. 用新鲜的培养基清洗绒毛样品，去除血细胞；
3. 在倒置显微镜下，仔细地去除残留的蜕膜碎片和血凝块；
4. 将样品转移到含有1ml蛋白酶E（4000000 PU/g）的15ml无菌离心管中，室温培养4～６分钟； 此步是为了从绒毛组织中分离外层的细胞（合体滋养层细胞）。
5. 加入3～5ml冷的Hank's 平衡盐溶液（+4℃）；
6. 1500rpm离心5分钟，去除上清液；
7. 加入2ml无菌Ⅱ型胶原酶（1mg/ml）， 37℃培养10分钟；
8. 加入3～5ml冷的Hank's 平衡盐溶液（+4℃）；
9. 1500rpm离心5分钟，去除上清液；
10. 加入2ml培养基，重新悬浮细胞；
11. 准备2～6只Chromslide培养皿（参考细胞的数量），向每只皿中加入约２～3ml培养基和约0.5ml的细胞悬液；
12. 37度培养（5% CO2）4～5天后，在倒置显微镜下检查细胞生长情况；
13. 当有丝分裂的细胞达到3～4个视野（100X）时，向细胞培养皿中加入1滴秋水溶液，继续培养4～6小时
