一、目的要求
掌握培养基母液的配制方法。
二、基本原理
配制培养基时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。以MS培养基为例,所需配制的母液可分为:MS大量元素母液、MS微量元素母液、MS铁盐母液和MS有机化合物母液等。另外,还要配制生长物质母液,在不同类型的培养基中使用。
三、实验材料
电子分析天平、扭力天平、烧杯(50mL、100mL、500mL、1000mL)、量筒、(1000mL、100mL、25mL)、容量瓶(1000mL、500mL、100mL),磨口试剂瓶(500mL、1000mL)、药勺、称量纸、玻璃棒、滴管、电炉(1000W)、冰箱。
配制MS培养基所需药品按培养基的配方准备(见附录 Ⅰ)。植物生长调节物质有2,4-D,NAA,6-BA等。
四、操作步骤
首先,按本书的附录 Ⅰ,将各种母液根据各自的扩大倍数,计算出扩大后的称取量,然后分别进行药品称取和母液配制。具体操作如下:
1.MS大量元素母液的配制
按照MS培养基配方的用量扩大20倍,将大量元素配制成20倍的母液。配制时先用量筒量取蒸馏水大约800mL, 放人1000mL的烧杯中,依次分别称取:NH4NO3 33 g、KN03 38 g、KH2P04 3.4 g、MgS04