准备试剂:
氯仿,异丙醇,75%乙醇(用DEPC处理过的水配制),无RNase的水.
1. 匀浆处理
a. 植物组织:以叶片RNA提取为例.取新鲜叶片在液氮中充分研磨或将 叶片剪碎后直接在TRNzol中研磨,研磨要迅速,最好不要超过1分钟. 大约100mg 叶片使用1 ml TRNzol.
b. 动物组织:以鼠肝脏RNA提取为例.取新鲜或-70℃冻存组织,每50- 100mg组织加1ml TRNzol,用匀浆仪进行匀浆处理.样品体积一般不要 超过TRNzol体积的10%.
c. 单层培养细胞.直接在培养板中加入TRNzol裂解细胞,每10cm 2面积加1ml TRNzo.用取样器吹打几次.注意:TRNzol加量根据培养板面积决定,不是由细胞数决定.如果TRNzol加量不足,可能导致提取的RNA中有DNA污染.
