实时定量PCR简介
定量PCR是在PCR定性技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术是一种在PCR反应体系中加入荧光基团利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA模板的定量而且具有灵敏度高、特异性和可靠性更强、能实现多重反应、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点 。
实时定量PCR的两个重要概念
（1）荧光域值（ threshold）： 以PCR反应的前15 个循环的荧光信号作为荧光本底信号，一般荧光域值定义为3---15个循环的荧光信号的标准偏差的10 倍。
(2)Ct值：也称循环阈值，C代表Cycle，t代表threshold。指在PCR循环过程中荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环次数。在实际操作中，这个时刻也就是每个反应管内的荧光信号到达设定的域值的时刻,可见Ct值取决于阈值。经数学证明，Ct值与模板DNA的起始拷贝数（dRn）成反比。
作用原理
实时荧光定量PCR常用的检测模式五种：
（1）TaqMan探针
（2）SYBR GreenⅠ
（3）LUX引物
(4)Molecular beacon
(5)荧光谐震能量传递（FRET,Roche product）
