Real time PCR的应用
mRNA表达的研究
微小残留病变的检测
肿瘤耐药基因表达的研究
病毒感染的定量监测
Vs普通PCR，RT-PCR的优势
采用封闭的检测模式，因此扩增产物导致污染的可能性比普通PCR要小得多 。
扩增产物的检测在PCR扩增过程中同时进行，并且数据的采集、分析全部由仪器自动完成，因此整个检测所需的时间比普通PCR要节省许多。
检测模式功能强大，具备定性、定量、突变、多项目等检测功能。而普通PCR要完成上述项目需采用不同的技术平台。
进行定量检测时，其定量线性范围（5-6 logs）比普通PCR（2-3 logs）要宽得多。
Real-time定量PCR仪是在普通PCR 仪的基础上再配备一个激发光源和荧光信号检测系统的装置。通过PCR反应的数学函数关系，加入标准品，可以对待测样品中的目标基因进行准确定量。
Real-Time PCR
热循环仪（PCR仪）
荧光检测系统
计算机及软件系统
回顾： PCR基本原理
PCR是在试管中进行DNA复制反应，基本原理与体内相似
在模板、引物、4种dNTP和耐热DNA聚合酶等存在的条件下，特异扩增位于两段已知序列之间的DNA区段的酶促合成反应。
基本步骤
>变性：加热使双链DNA变为单链
>退火：降温使引物和互补模板在局部形成杂交链
>延伸：耐热DNA聚合酶按5′→3′方向催化以引物为起始点的延伸反应
示意图
Real-time定量PCR仪是在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
