细胞表面染色基本操作过程
直标法：
全血标本（EDTA抗凝）
在Facoll管中加入一定体积的直标抗体，加入50/100ul全血，
混匀，室温避光孵育15-30分钟（参照说明书）
加入1ml/2ml溶血素，振荡混匀，避光室温孵育10分钟
1000rpm离心5分钟
弃上清，混匀，加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
细胞标本（包括红细胞，PBMC，培养细胞及血小板）
在Facoll管中加入一定体积的直标抗体，加入1×106的细胞
混匀，室温避光孵育15-30分钟（参照说明书）
加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
间标法
全血标本（EDTA抗凝）
在Facoll管中加入一定体积的纯化抗体，加入50/100ul全血，
混匀，室温孵育15-30分钟（参照说明书）
加入1 ml/2ml溶血素，振荡混匀，避光室温孵育10分钟
1000rpm离心5分钟
弃上清，混匀，加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入一定体积荧光标记二抗，混匀，室温避光孵育15-30分钟
加入1-2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
细胞标本（包括红细胞，PBMC，培养细胞及血小板）
在Facoll管中加入一定体积的纯化抗体，加入1×106的细胞
混匀，室温孵育15-30分钟（参照说明书）
加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
弃上清，加入一定体积荧光标记二抗，混匀，室温避光孵育15-30分钟
加入1-2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
细胞内抗原染色基本操作过程
直标法
全血标本（EDTA抗凝）
在Facoll管中加入一定体积的细胞表面直标抗体，加入50/100ul全血，
混匀，室温避光孵育15-30分钟（参照说明书）
加入1ml/2ml溶血素，振荡混匀，避光室温孵育10分钟
1000rpm离心5分钟
弃上清，混匀，加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml固定液，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入0.5-1ml破膜剂，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入直标细胞内抗体抗体，室温避光孵育15-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
细胞标本（包括红细胞，PBMC，培养细胞及血小板）
在Facoll管中加入一定体积的细胞表面直标抗体，加入1×106的细胞
混匀，室温避光孵育15-30分钟（参照说明书）
加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml固定液，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入0.5-1ml破膜剂，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入直标细胞内抗体抗体，室温避光孵育15-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
间标法
全血标本（EDTA抗凝）
在Facoll管中加入一定体积的细胞表面直标抗体，加入50/100ul全血，
混匀，室温避光孵育15-30分钟（参照说明书）
加入1ml/2ml溶血素，振荡混匀，避光室温孵育10分钟
1000rpm离心5分钟
弃上清，混匀，加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml固定液，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入0.5-1ml破膜剂，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入一定体积的纯化抗体，混匀，室温孵育15-30分钟（参照说明书）
1000rpm离心5分钟
弃上清，混匀，加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入一定体积荧光标记二抗，混匀，室温避光孵育15-30分钟
加入1-2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
细胞标本（包括红细胞，PBMC，培养细胞及血小板）
在Facoll管中加入一定体积的细胞表面直标抗体，加入1×106的细胞
混匀，室温避光孵育15-30分钟（参照说明书）
加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml固定液，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入0.5-1ml破膜剂，混匀，室温避光孵育20-30分钟
加入1ml PBS，1000rpm离心5分钟，弃上清
加入一定体积的纯化抗体，混匀，室温孵育15-30分钟（参照说明书）
1000rpm离心5分钟
加入2ml PBS，1000rpm离心5分钟
弃上清，加入一定体积荧光标记二抗，混匀，室温避光孵育15-30分钟
加入1-2ml PBS，1000rpm离心5分钟
加入0.5-1ml PBS重悬，即可上机检测
