所需溶液配制
（1）TE缓冲液：10mM Tris×Cl，1mM EDTA，pH 8.0，高压灭菌。
（2）1M Tris×Cl：121.14g Tris碱溶于800ml双蒸水中，用盐酸
调pH值至8.0，定容至1000ml，高压灭菌。
（3）0.5M EDTA：186.1g EDTA溶于800ml双蒸水中，用NaOH调pH值至8.0，定容至1000ml，高压灭菌。
（4）10% SDS：SDS 100g溶于900ml双蒸水中，加热至68℃助溶，用盐酸调pH值至7.2，定容至1000ml。
（5）1×SET缓冲液：0.01M Tris×Cl，0.005M EDTA，0.5% SDS，高压灭菌。
（6）10×TBE缓冲液：将54g Tris碱，27.5g硼酸和20ml 0.5mol/L EDTA(pH 8.0)加到800ml双蒸水中，定容至1L。
（7）蛋白酶K贮液（10mg/ml）：将100mg蛋白酶K溶解于10ml灭菌蒸馏水中，分装后贮存于-20℃。
（8）饱和酚溶液：在68℃水浴锅中溶解结晶酚，160℃蒸馏，加入8-羟基喹啉至终浓度0.1%，加入等体积0.5M Tris×Cl(pH 8.0)，摇动混合20min，分液漏斗中静置，分层后留下层黄色酚液，加入等体积0.1M Tris×Cl(pH 8.0)，0.2%b-巯基乙醇（每800ml酚液中加入200ml）。
（9）EB贮存液（10mg/ml）：在10ml双蒸水中溶解100mg EB。
（10）Ⅲ型6×凝胶加样缓冲液：0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青 FF，30%甘油水溶液，4℃保存
血液基因组DNA的提取
1．取样本静脉血1ml,放入装有1ml抗凝剂（0.5mol/LEDTA）EP管中。
2.6000r/min离心15min,取白细胞层与另一10ml离心管中。
3.加两倍体积双蒸水，轻轻摇匀，静止15min,以破碎残余红细胞。
4.6000r/min离心15min，弃上层红细胞，留白细胞沉淀。加入1×SET缓冲液1ml,悬浮白细胞。在加入10mg/ml蛋白酶K 40ul、10% SDS100 ul（用枪吹打，使沉淀充分悬浮）。55℃水浴消化过夜。
注：a:此后步骤皆用剪平枪头的1ml枪头操作；
b:每步换管后标记以防样品混淆
c:酚具有腐蚀性，必须带手套操作。
5.将消化液一分为二，将其转入两个1.5 mlEp管中。加入等体积的饱和平衡酚，轻轻摇匀10min，12000r/min离心15min，吸取上层水相于另一离心管中。
6.用剪平的枪头吸出上层水相于另一离心管中，弃来去下层苯酚（如上层水相混浊可重复操作一次）
7.加入等体积酚/氯仿/异戊醇（25：24：1），轻轻摇匀10min,12000r/min离心15min,吸取上层水相于另一离心管中。
8.加入等体积氯仿/异戊醇（24：1），操作同上。
9.加入两倍体积预冷（－20℃）的无水乙醇，轻轻摇动离心管即有白色絮状DNA析出。记录DNA的量。
10.12000r/min离心5min使DNA沉淀于管底部，弃去乙醇。
11.待DNA干燥后，加入50ul TE/管，溶解DNA，置-20℃保存。
1.2.2 基因组DNA的浓度测定和质量检测
（1）测定DNA浓度：吸取2ul DNA样品，加双蒸水100ul，转入石英比色杯中，在蛋白核酸浓度测定仪中测定其浓度，并根据OD260/OD280比值分析DNA样品的纯度。
（2）检测DNA的质量：制备0.8%琼脂糖凝胶，内含0.5ug/ml溴化乙锭，倒入模具中待其自然凝固后，在电泳槽中倒入0.5×TBE电泳缓冲液。在DNA样品中加入1/6的Ⅲ型上样缓冲液，混合均匀后上样，同时在旁边的加样孔内加入1.5ul DNA Ladder Marker 100bp作为对照。以5V/cm电压（50V）电泳，当指示剂移至凝胶3/4时停止电泳，取出凝胶，紫外灯下观察并照相。
