美国ANASPEC公司在成功地开发和上市具有专利保护的(硫醇)Thiol定量测定试剂盒后,应许多客户的要求,该公司又开发了高灵敏度的总谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒。
谷胱甘肽检测试剂盒提供了一种简便的高度灵敏荧光检测方法,用来测定总谷胱甘肽浓度(GSH+GSSG)。其原理是应用了一种全新的荧光试剂,与还原型的GSH接触和反应后,释放出荧光,在波长490/520 nm可用荧光检测仪测出。在谷胱甘肽还原酶作用下,氧化型谷胱甘肽会转变为还原型谷胱甘肽,因此可对总谷胱甘肽水平进行定量测定。本试剂盒灵敏度线性范围是0.2-100 mM 谷胱甘肽,在试剂盒中包括5-磺基水杨酸(Sulfosalicyclic acid)以去除生物样品中的蛋白质。
同时ANASPEC还开发了检测总谷胱甘肽水平的显色反应试剂盒,试剂盒中含有Eliman氏试剂 [5, 5?dithiobis (2-nitrobenzoic acid)]。Eliman氏试剂与谷胱甘肽接触反应后会释放出有颜色的产物,用ELISA检测仪在415 nm波长处可以测出。显色反应的强度与谷胱甘肽浓度成正比。
谷胱甘肽在动物、植物和原虫是主要的硫醇复合物,谷胱甘肽在细胞抵抗氧化物的损害中起着关键作用,是谷胱甘肽转移酶和谷胱甘肽过氧化酶的共同因子。在维持细胞内氧化还原状态,氨基酸转移和线粒体呼吸中谷胱甘肽也起着作用。总谷胱甘肽包括还原型和氧化型两种形式,谷胱甘肽氧化后就转变为GSSG。由于GSSG的数量增加,GSH/GSSG比例就会下降,检测GSH和GSSG的浓度以及它们的分子浓度比例,是细胞的功能和氧化物损害水平的重要指标。
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