摘要：应用RT-PCR方法, 从葡萄组织中克隆了两个芪合酶基因的编码区(1.19 kb). 在大肠杆菌中能特异表达42 ku的蛋白质, 其分子量与芪合酶大小一致, 并用其制备了兔抗血清. 利用pBin438构建了植物组成型表达载体, 经农杆菌介导获得转基因烟草植株. PCR, Southern blot, Western blot和RT-PCR分析证明该基因已整合到烟草的染色体中, 并正常转录和特异表达. 薄层层析和HPLC的结果进一步判断表达的芪合酶在烟草中可催化其底物合成3, 4′, 5-三羟基反式芪(trans-resveratrol), 从转基因烟草中纯化的3, 4′, 5-三羟基反式芪能使人乳腺癌细胞停留在G0, G1期的细胞数增加。
作者： 腊平 蔡文启 张玖春 张凤丽 方荣祥
作者单位： 中国科学院微生物研究所植物生物技术实验室,
关键词： 芪合酶基因 转基因烟草 3,4′,5-三羟基反式芪 人乳腺癌细胞
