作者：吳丹莉 張友榮 勞妙芬 邱兆華 哈小琴 吳祖澤
摘要：為研究腺病毒載體介導肝細胞生長因子對心肌缺血基因治療的可行性, 首先用RT-PCR方法從人胎盤cDNA文庫中克隆人肝細胞生長因子(HGF)基因全長編碼區cDNA, 通過脂質體共轉染和細胞內質粒同源重組的方法構建了攜帶肝細胞生長因子基因的重組腺病毒Ad-HGF。 經過在293細胞系內的擴增和氯化銫密度梯度離心獲得大量純化的重組腺病毒。 體外實驗中用ELISA方法證明肝細胞生長因子能在原代培養的乳大鼠心肌細胞中表達并分泌到培養上清液中。 然后用MTT方法測定了其對內皮細胞的刺激增殖作用。 活體實驗中用綠色熒光蛋白基因作為報告基因檢測了腺病毒在大鼠體內的分布和表達持續時間, 通過大鼠冠狀動脈結扎后制作的心肌缺血動物模型, 證明重組腺病毒Ad-HGF對大鼠心肌缺血的治療是有效的。 以上結果說明Ad-HGF的構建是成功的, 在體內外都顯示了其生物學活性, 為基因治療缺血性心臟病提供了實驗依據。
關鍵詞：心肌缺血 基因治療 重組腺病毒 肝細胞生長因子
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