高芳銮 范国成 沈建国 谢荔岩 林奇英 吴祖建 谢联辉
摘要：为揭示水稻瘤矮病毒(RGDV)外层衣壳蛋白P8的结构特点及其在大肠杆菌中的表达特性。利用生物学软件和在线分析工具，对RGDV P8蛋白结构特征进行了生物信息学分析；同时将通过RT-PCR扩增的P8基因克隆到pGEX4T-1上，构建pGP8转化大肠杆菌E。coli BL21(DE3),在IPIG诱导下表达.利用表达的融合蛋白免疫家兔，制备了抗血清,并以RGDV、水稻矮缩病毒(RDV)、水稻条纹病毒(RSV)、水稻锯齿叶矮缩病毒(RRSV)4种病毒作为供试材料进行特异检测。分析显示P8蛋白在C端位置有一个典型的跨膜螺旋区，整个蛋白也具有Phytoreo P8家族共有的典型结构域Phytoreo P8 domain。SDS-PAGE和蛋白印记分析表明，RGDV P8融合蛋白分子量约为73kDa，以包涵体的形式获得了高效表达。获得的效价高、特异性强的抗血清，为水稻瘤矮病毒的快速检测及P8蛋白的功能研究奠定了基础。
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