白芷細胞外ECBP21全長cDNA克隆

2011-07-06 09:37 · sundaye

ECBP21是從白芷懸浮培養細胞外檢測并純化的一種依賴鈣的鈣調素結合蛋白。利用RT-PCR和5'-RACE方法,獲得其cDNA全長。ECBP21 cDNA全長947 bp,編碼216個氨基酸,其中N端1~25氨基酸為信號肽,26~216氨基酸為成熟蛋白肽段,而且26~45氨基酸序

作者:毛國紅 湯文強 郭毅 丁存寶 周人綱 孫大業

摘要:ECBP21是從白芷懸浮培養細胞外檢測并純化的一種依賴鈣的鈣調素結合蛋白。利用RT-PCR和5'-RACE方法,獲得其cDNA全長。ECBP21 cDNA全長947 bp,編碼216個氨基酸,其中N端1~25氨基酸為信號肽,26~216氨基酸為成熟蛋白肽段,而且26~45氨基酸序列與純化ECBP21 N末端測序結果完全一致。將此cDNA成熟蛋白編碼區核苷酸片段導入pET-28b(+)表達載體中,并在大腸桿菌表達系統中誘導表達,經CaM-Geloverlay檢測證實表達蛋白具有Ca2+依賴的鈣調素結合特性,從而進一步證實了cDNA克隆的正確性。這為進一步用分子生物學方法研究植物細胞外多肽ECBP21的生物學功能奠定了基礎。

關鍵詞:細胞外鈣調素結合蛋白 ECBP21 cDNA克隆 蛋白表達 白芷

论文链接:https://d.wanfangdata.com.cn/periodical_kxtb200209009.aspx

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