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免疫磁珠富集净化--超高效液相色谱法同时测定陈皮中4种黄曲霉毒素
(摘自:Chinese Journal of Chromatographg)
关键词
Enriching beads
NHS磁珠
免疫磁珠
黄曲霉毒素
超高效液相色谱法
摘 要
将 Prot Elut NHS(N-羟基丁二酰亚胺)偶联磁珠与抗黄曲霉毒素总量单克隆抗体偶联得到黄曲霉毒素总量免疫磁珠,其具有较好的分散性,良好的磁性能和特异的选择性。本文建立了陈皮中 4 种黄曲霉毒素的免疫磁珠富集净化,超高效液相色谱(UPLC)检测方法。样品经甲醇-PBS 缓冲溶液(2∶8,v/v)提取后用免疫磁珠富集净化,1mL甲醇洗脱;经 ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8 μm)分离,以水和甲醇为流动相梯度洗脱,采用汞/ 氙灯荧光检测器测定。实验结果表明,4 种黄曲霉毒素在各自的线性范围内峰面积与其质量浓度线性关系良好,相关系数(r2)大于 0.999;检出限(信噪比为 3)为 0.013 ~ 0.038 μg/kg,定量限(信噪比为 10)为0.044~1.2 μg/kg;平均回收率为 63. 9%~115.0%,相对标准偏差为 0. 4%~14. 2%,均符合痕量分析的要求。该方法简单快速、准确可靠,可用于陈皮中 4 种黄曲霉毒素的测定。
下载原文:https://www.bio-enriching.com/uploadfiles/2018/10/201810231314271427.pdf
蓝色二氧化硅纳米粒子比色免疫分析1检测鸡白痢沙门氏菌
(摘自:Analytical Methods)
关键词
Enriching beads
NHS磁珠
免疫磁珠
捕获探针
比色免疫分析
摘 要
建立了以蓝色二氧化硅纳米粒子(Blue-SiNPs)为载体的白痢沙门氏菌(S.pullorum)定量免疫分析方法。采用反相微乳液法,将C.I.活性蓝21掺杂到二氧化硅纳米粒子中,合成了蓝色SiNPs。用抗白喉菌功能化的蓝色SnPS作为探测器探针。以磁性纳米粒子(MNPs)为载体,固定化抗白痢多克隆抗体。用磁铁分离MNPs-S.pullorum-Blue-SiNPs的夹心结构并用NaOH刻蚀。从二氧化硅纳米颗粒中释放的C.I.活性蓝21用作比色指示剂。C.I.活性蓝21在675 nm处的吸光度与白痢的浓度成正比。在最佳条件下,建立的比色免疫分析法对白痢菌的动态范围为4.4×102CFU/mL~4.4×107CFU/mL,检测限为4.4×101CFU/mL。鸡肝白痢的回收率为94.5%~108%,与官方标准培养法的相关系数(R2=0.9989)对比结果良好。同时,这种比色免疫分析可在酶标仪的96孔板上进行。该方法经济、简便、快速、专属性强、稳定性好。该技术为其它病原菌和病毒的检测提供了依据。这种简单的比色免疫分析法作为细菌和病毒临床诊断的现场工具具有巨大的潜力。
下载原文:https://www.bio-enriching.com/uploadfiles/2018/10/20181023130922922.pdfMAg25K/NHS产品介绍
【英芮诚5868计划专享】
MAg25K/NHS产品介绍
特点
· 简便,无需活化,表面的N-羟基琥珀酰亚胺配体可直接与含伯胺基的生物配体进行共价偶联,形成稳定的酰胺键;
· 高效,生物配基偶联效率可达90%以上,大大高于同类羧基或者氨基磁珠,同时配基的结合载量相比同类的羧基或者氨基磁珠高2~3倍;
· 在小样本量或大样本量内都能简单捕获目标蛋白;
· 快速,1~2小时便可完成生物配基偶联;
· 温和,室温或4℃偶联,偶联体系pH为5~9;
· 良好的生物相容性,减少非特异性吸附,在IP实验或pull down实验中具有较低的背景干扰。
应用
适用于含伯胺基的蛋白质或生物分子的共价偶联,并用于各种类型的IP,pull-down,蛋白抗体纯化,免疫检测等领域。
表面基团密度
40~80 µmol/mL (100% v/v) medium slurry
蛋白结合能力
~2000μg protein A /mL (10%,v/v)medium slurry
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