《临床肿瘤学杂志》(Journal of Clinical Oncology) 7月30日在线发表的一份研究报告显示，只需进行1次HPV DNA检测即可预测至少未来18年内女性患宫颈癌的风险，识别出哪些人已经患有浸润性宫颈癌，哪些人的HPV感染未来会导致发病。相比之下，巴氏涂片检查无法预测1~2年后具有重要临床意义的疾病。
美国临床肿瘤学会(ASCO)的Philip E. Castle博士及其同事对来自俄勒冈州波特兰市的由19,512名女性组成的队列进行了分析，所有受试者均在1989~1990年接受了常规细胞学筛查，基线年龄介于16~94岁。研究者采用目前临床上常规使用的商业化诊断性检查手段对受试者的宫颈阴道灌洗液进行了回顾性HPV DNA检测。
受试者接受了大约18年的随访，每年进行1次巴氏涂片检查。在此期间共有199例被确诊为患有浸润性宫颈癌(宫颈上皮内瘤样病变[CIN]3级+)，共发现396例CIN2+患者。基线巴氏涂片阳性对于2年内的宫颈癌具有很强的预测价值，但无法预测该时间点之后的宫颈癌风险。相比之下，HPV DNA检测阳性可持续预测受试者的宫颈癌风险直至研究结束。
举例来说，在入组研究后10~18年期间，与HPV阴性者相比，HPV阳性者被诊断为CIN2+ 和 CIN3+的几率更大，而巴氏涂片阳性者被诊断为CIN2+ 或CIN3+的几率并未高于巴氏涂片阴性者。
同样，基线单次HPV检测阴性与单次巴氏涂片阴性相比，“更能保证受试者在未来18年的随访期内出现CIN2+(1.85% vs. 2.47%)和CIN3+(0.90% vs. 1.27%)的可能性不大。”此外，与巴氏涂片阳性结果相比，HPV阳性结果后出现CIN2+(215例 vs. 136例)和CIN3+(112例vs. 65例)的病例数也更多。在基线HPV DNA检测阳性且随后出现了CIN2+或CIN3+的受试者中，只有一半患者的巴氏涂片检查结果呈阳性。
研究者称，上述结果“进一步支持HPV检测作为30岁及30岁以上女性的常规筛查方法。”此外，其他研究结果表明HPV检测还可能有助于识别出哪些女性存在罹患宫颈原位腺癌和浸润性腺癌的风险，而这两种疾病“单纯通过细胞学筛查是很难发现的”。
Castle博士及其同事指出：“与巴氏涂片检查相比，HPV检测对于CIN3和宫颈癌的预测价值更大，因此可以作为健康女性的宫颈癌筛查手段。而巴氏涂片则可以作为次要的诊断性检查来识别出哪些HPV阳性者近期就有患上浸润性宫颈癌的风险。”
该研究的部分经费由美国国立癌症研究所资助。Castle博士声明与默克、Qiagen和罗氏公司存在利益关系，其同事Attila T. Lorincz博士声明与Qiagen公司存在利益关系。
延伸阅读：什么是HPV DNA检测
HPV感染是宫颈癌的主要致病元凶，研究表明99.7%的宫颈癌患者存在HPV感染。但是大部分HPV感染无临床症状或为亚临床感染，因此，该感染不能作为一个普通的临床疾病或通过常规筛查计划或性传播疾病调查得以发现，只能通过HPV DNA检测得知。由于宫颈HPV感染多为隐性亚临床感染，且HPV不能在培养环境中稳定生长，故HPV DNA检测这一敏感而可靠的分析方法直至近10余年才较成熟。目前国际上很多发达国家都已经将HPV DNA榆测列为宫颈癌筛查的必榆项目，并已经列入宫颈癌诊断防治指南中，而这些筛查手段在发展中国家包括中国还远未普及。
HPV的检测内容包括感染HPV的型、量以及持续时间，这些都决定着病变的发展与预后。目前HPV-DNA的检测主要通过应用分子生物学方法，包括核酸杂交方法和聚合酶链反应(PCR)技术。国内用的也多是这两项技术。其详情如下：
1、通用型引物聚合酶链反应(PCR)系统(MY09/11和GP5+/6+pairs两大系统)
聚合酶链反应有较高的敏感度，可对HPV感染者进行准确的早期诊断，并可对HPV进行快速分型检测，从而有利于患者的早期发现和治疗。缺点是对实验室环境要求较高，容易发生样本间的交叉感染，从而导致假阳性率增高。
2、核酸杂交检测
有较好的特异性和敏感度，还可以进行HPV-DNA的分型，各种核酸杂交检测方法有一定的优缺点。
核酸印迹原位杂交——适用于HPV分型和HPV-DNA分子量鉴定，灵敏度高，但操作复杂，需新鲜组织标本，不便于临床推广。
斑点印迹——其敏感度和特异性均低于核酸印迹原位杂交法，经济实用，但实验过程中存在有放射性污染，是环保所不能轻视的问题。
原位杂交——通过非放射性探针对石蜡组织进行检测，且能做定位检测，假阳性率低，但灵敏度不高，大大降低了临床使用价值。
杂交捕获法(主要为HC-Ⅱ系统)——杂交捕获试验是利用分子杂交化学发光，使信号放大的原理，无需基因扩增，使复杂的核酸检测变得像免疫分析般简单。首先使DNA双链释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链，DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂合体，特异性抗体将RNA-DNA杂合体捕获，偶联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂合体的结合，碱性磷酸酶使酶底物发光，根据光的强弱可确定碱性磷酸酶的含量，从而确定RNA-DNA杂合体的含量，其检测低限为HPV-DNA 0.2～1.0ng/L。HC-Ⅱ检测系统采用专利的全长8000bp的RNA探针及专利的特异性第一抗体，目前能一次性精确地检测出18种HPV，其中有13种高危型HPV病毒亚型，包括HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68型，而这13种病毒亚型就是引起宫颈癌的直接原因。HC-Ⅱ检测系统是目前唯一获得美国FDA许可的HPV检测方法。此技术配有专用的标本采集保存器，常温下标本可保存2周，无需特殊实验条件，操作简单，易培训。
以上方法比较，杂交捕获法(尤为HC-Ⅱ系统)有高度自动化、标准化；阴性预测值99.9%；不受采样、阅片者之误差影响；有良好的重复性，可有效地降低CINⅢ和宫颈癌的漏诊率，且操作简单，是许多临床筛查的首要选择。
Clinical Human Papillomavirus Detection Forecasts Cervical Cancer Risk in Women Over 18 Years of Follow-Up
Philip E. Castle, Andrew G. Glass, Brenda B. Rush, David R. Scott, Nicolas Wentzensen, Julia C. Gage, Julie Buckland, Greg Rydzak, Attila T. Lorincz and Sholom Wacholder
Purpose To describe the long-term (≥ 10 years) benefits of clinical human papillomavirus (HPV) DNA testing for cervical precancer and cancer risk prediction.
Methods Cervicovaginal lavages collected from 19,512 women attending a health maintenance program were retrospectively tested for HPV using a clinical test. HPV positives were tested for HPV16 and HPV18 individually using a research test. A Papanicolaou (Pap) result classified as atypical squamous cells of undetermined significance (ASC-US) or more severe was considered abnormal. Women underwent follow-up prospectively with routine annual Pap testing up to 18 years. Cumulative incidence rates (CIRs) of ≥ grade 3 cervical intraepithelial neoplasia (CIN3+) or cancer for enrollment test results were calculated.
Results A baseline negative HPV test provided greater reassurance against CIN3+ over the 18-year follow-up than a normal Pap (CIR, 0.90% v 1.27%). Although both baseline Pap and HPV tests predicted who would develop CIN3+ within the first 2 years of follow-up, only HPV testing predicted who would develop CIN3+ 10 to 18 years later (P = .004). HPV16- and HPV18-positive women with normal Pap were at elevated risk of CIN3+ compared with other HPV-positive women with normal Pap and were at similar risk of CIN3+ compared with women with a low-grade squamous intraepithelial Pap.
Conclusion HPV testing to rule out cervical disease followed by Pap testing and possibly combined with the detection of HPV16 and HPV18 among HPV positives to identify those at immediate risk of CIN3+ would be an efficient algorithm for cervical cancer screening, especially in women age 30 years or older.
