T细胞受体(T cell receptor，TCR)是T细胞表面特异性识别抗原和介导免疫应答的分子，是人类基因组中多态性最高的区域之一，决定着人的免疫系统如何适应环境的变化。
T细胞受体库的多样性(包括基因重组以及选择性表达)直接反映了机体免疫应答的状态。正常个体在无抗原刺激时，TCR基因重排是随机的，因此正常人外周T细胞呈多家族、多克隆性特点。不同抗原(肿瘤、疫苗、病院微生物或者移植物等)刺激后，TCR 基因可对该抗原产生特异性识别，并使带有这类基因的T细胞得到优势扩增。
◆ 技术特点：
·多重扩增：使用多重PCR引物对TCRβ的CDR3区域进行扩增；
·高通量：一次测序得到百万级别条数的序列信息；
·高准确性：从几个到几十万个拷贝的精确计数；
·高分辨率：可以精确检测至单碱基差异；
·重复性好：深度测序保证了检测的随机性，可不需技术重复；
◆ 检测流程：
TCR多样性分析：多个引物，多重PCR；
human TCR——多个 V-seg fwd primers；一个 C-seg rev consensus primer；
实验流程（引物设计，多重PCR）：
mouse TCR——多个 V-seg fwd primers；一个C-seg rev consensus primer；
实验流程（引物设计，多重PCR）：
从样品中分离获得T/B细胞，之后富集TCR序列，进行高通量测序，结合生物信息学分析获得TCR重组的信息。 具体：在V基因上设计多个上游引物，在C基因上设计多个下游引物，直接进行多重扩增获取TCR的序列 B，通过5’RACE获得TCR的序列。
◆ 结果提交：
信息学分析，1. 去除污染序列；2. V, D, J, C mapping；3. CDRs 拼接碱基序列组成；
4. Vβ所属亚家族；5. V-J 组合分布 (2-D, 3-D map)；6. CDR3长度分布；
7. V-J组合频率、CDR3表达频率、多态性和长度分布；8. 对缺失的碱基、V-D、
D-J插入的碱基进行分析和统计，计算其频率分布；
启因生物针对T细胞受体测序(TCR seq)，采用多重扩增的手段获取TCRβ的CDR3区域，结合高通量测序技术以及生物信息学分析手段，分析VDJ重排的方式等，此技术广泛应用于肿瘤免疫、自身免疫性疾病、器官移植免疫监测、疫苗注射免疫监测等领域。
◆ 检测样品：
T细胞和B细胞，外周血单核细胞 (PBMCs)，全血，组织 (包括FFPE组织)，gDNA或cDNA；
◆ 检测项目：
1，人 2，鼠
T-cell receptor beta (TCRB) T-cell receptor beta (TCRB)
T-cell receptor alpha/delta (TCRA/D)
T-cell receptor gamma (TCRG)
IGH
IG kappa/lambda (IGΚ/L)
◆ 数据分析特点：
◆ 应用实例：
[1].Profiling the T-cell receptor beta-chain repertoire by massively parallel sequencing,2009,
genome Research.（见下图）
图：A，Representation of the TCRblocus at human chromosome 7q34；B，Frequencies of V-J pairing calculated from the subset of clonotypes with an unambiguousTRBVgene segment assignment (n=22,704)；
[2].T Cell Receptor Stimulation-Induced Epigenetic Changes and Foxp3 Expression Are Independent and Complementary Events Required for Treg Cell Development,2012,Immunity.（见下图）
[3].A role for cohesin in T-cell-receptor rearrangement and thymocyte differentiation,2011,Nature.
[4].Linking T-cell receptor sequence to functional phenotype atthe single-cell level,2014,Nature
Biotechnology.
