众所周知,间充质干细胞(Mesenchymalstem cells,MSCs)在无血清培养基中的扩增,是科研和临床研究的第一步,也是细胞技术临床应用的关键。然而,用无血清培养基从人组织中分离原代MSCs的效率颇低,这已经是各实验室公认的技术难点,其根源在于无血清培养基中缺少促进细胞贴壁的蛋白质。美国StemRD公司最新研发并投入市场的MSCprime®是一款为从人组织中分离原代MSCs而开发的添加物。本产品不含血清、化学成分明确。与StemRD公司出品的MesenGro®无血清、化学成分明确MSC培养基一起使用,能大大提高分离原代细胞的效率,为广大科研工作者从人组织中获取和扩增MSC细胞提供了强有力的支持和帮助。
MSCprime®原代间充质干细胞添加液拥有如下技术特点:
1. 提高原代MSCs的种植效率
2. 获得细胞均质性更高、形态更具干细胞特性
3. 不含血清(不含人源、动物源血清)
4. 化学成分明确(所有成分均为纯化或重组产生)
5. 产品批次间一致性优于血清和其他成分不明添加物
MSCprime®原代间充质干细胞添加液操作简便,用量适宜。其具体使用方法如下:
1. 使用前,将MSCprime®在2 至8°C解冻。
2. 将含有MSCs的原代细胞(如骨髓抽取液的单核细胞)加入10倍体积的MesenGro®无血清、化学成分明确MSC培养基(StemRD cat# MGro-500),1500 rpm 离心10分钟以沉淀细胞。
3. 细胞离心期间,将MSCprime®用MesenGro®以1:24的比例稀释。
4. 用稀释后的MSCprime®/MesenGro®培养基重悬细胞沉淀,转移至CellBIND®(如T25培养瓶,Corningcat# 3289 )细胞培养瓶,置于37°C,5% CO2温箱中培养。
5. 培养2至6天后将培养基换成MesenGro®完全培养基。合适的首次换液时间依组织类型而定。根据我们的经验,合适骨髓MSC的首次换液时间是培养2天后,而脐带则是6天。应以出现MSCs样细胞团落作为判断依据。
6. MSCprime®为浓缩液(25X),以干冰保存运输。MSCprime®日常储存于-80°C,有效期为6个月。稀释后的MSCprime®储存于2至8°C,应在两周内用完并尽量避免反复冻融为佳。
在使用MSCprime®原代间充质干细胞添加液处理人的脐带组织的实验中,我们分别从下面两个方面证实了MSCprime®的效果:
用MSCprime®从人脐带组织中分离出MSC样细胞。
2. MSCprime®分离培养的MSC在MesenGro®中增殖迅速,表现出更好的均质性和细胞形态
综上所述,StemRD新推出的MSCprime®原代间充质干细胞添加液将会成为广大科研工作者在处理人组织中提取并扩增原代MSC细胞有力的工具,再加上其组成及化学成分确定,操作简便的技术特点,必定会成为您的实验首选。