徐彬 靳大勇 王单松 刘新垣 秦新裕
目的 :构建携带人lipocalin 2基因且删除E1855基因的溶瘤腺病毒,研究其体外对胰腺癌细胞生长的抑制作用。
方法 :利用RT-PCR技术获得lipocalin 2基因并克隆至pCA13质粒,构建pCA13-lipocalin 2.用Bgl Ⅱ从pCA13-lipocalin 2酶切出包含CMV启动子及lipocalin 2的表达框,将该表达框亚克隆入质粒pZD55,获得pZD55-lipocalin 2。将pZD55-lipocalin 2与pBHGE3共转染293个细胞,重组产生携带lipocalin 2的溶瘤腺病毒ZD55-lipocalin 2.经PCR和Western blot鉴定正确后,体外采用结晶紫染色和MTT法,观察其对胰腺癌细胞生长的抑制作用。
结果 :ZD55-lipocalin 2能在PANC-1细胞中增殖复制并表达lipoealin 2蛋白,结晶紫染色和MTT法观察到该溶瘤腺病毒能明显抑制PANC-1细胞生长。
结论: 成功构建了携带入lipocalin 2的溶瘤腺病毒,其能明显抑制胰腺癌细胞生长,为胰腺癌治疗提供新策略。
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