二價銅離子對牛正常朊蛋白二級結構的影響

2011-07-06 15:16 · raozihe

摘要:研究了二價銅離子對牛朊蛋白的二級結構的影響.牛朊蛋白(BoPrPc)的小分子(BoPrPcS)和大分子(BoPrPcL)經初步純化后,在含Cu2+的堿性溶液中氧化,用反相柱進行氧化態和還原態的BoPrPcL和BoPrPcS的分離.質譜分析證明氧化態的Bo-prPcL和BoP

摘要:研究了二價銅離子對牛朊蛋白的二級結構的影響.牛朊蛋白(BoPrPc)的小分子(BoPrPcS)和大分子(BoPrPcL)經初步純化后,在含Cu2+的堿性溶液中氧化,用反相柱進行氧化態和還原態的BoPrPcL和BoPrPcS的分離.質譜分析證明氧化態的Bo-prPcL和BoPrPcS分子質量分別為24.064,15.819 ku.用遠紫外圓二色譜(Far-UV CD)分析顯示,BoPrPcS在208和222 m處出現兩個負峰,為典型的α-螺旋型結構;而Bo-PrPcL在222 nm處負峰減小.與未經氧化的BoPrPcL的質譜和CD結果比較后發現,氧化后的BoPrPcL在八肽重復區結合了6個Cu2+,其β-折疊含量明顯增加.而Cu2+對BoPrPcS二級結構基本無影響.BoPrPcL結合Cu2+的特性及其二級結構的相應變化可能與細胞內抗Cu2+毒性與氧化壓力有關.

作者:     陳微濤    王大偉    饒子和    田波

作者單位:陳微濤,王大偉,田波(中國科學院微生物研究所分子病毒學研究室,北京,100080)

饒子和(清華大學結構生物學研究所,北京,100084)

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